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發布者: 發布時間:2022-05-07 19:44:09
DAPI染色液(5 mg/mL)
DAPI Stain Solution (5 mg/mL)
產品貨號:JY06013 規格:5 mg/mL×0.2 mL 銷售價格:¥200
產品簡介
DAPI,即4’,6-聯脒-2-苯基吲哚二鹽酸鹽,4’,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride,也稱DAPI dihydrochloride,分子式為C16H15N5·2HCl,分子量為350.25,CAS號28718-90-3。
DAPI是一種常用的可以穿透細胞膜的藍色熒光核酸染料,和雙鏈DNA結合后可以產生比自身強20多倍的熒光。和EB(ethidium bromide)相比,DAPI對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。DAPI的更大激發波長為340 nm,更大發射波長為488 nm;DAPI和雙鏈DNA結合后,更大激發波長為358 nm,更大發射波長為461 nm。DAPI也可對RNA進行染色,染色機理是其可以選擇性嵌入“AU序列”并發出熒光。相比DAPI-dsDNA (Ex/Em=358 nm/461 nm),DAPI-RNA具有較長的更大發射波長(500 nm),其熒光亮度僅有DAPI-dsDNA的20%。盡管DAPI不能通過活細胞膜,但可以通過提高濃度使之進入活細胞。
DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用來檢測酵母線粒體DNA,葉綠體DNA,病毒DNA,Microplasm DNA以及染色體DNA。DAPI典型的藍色熒光特性使其非常普遍的搭配其他綠色、黃色或紅色熒光染料用于細胞生物學多色熒光標記技術,因此也常作為核酸和染色體的復染劑用于細胞凋亡檢測、RNA原位雜交、直接或間接免疫檢測等領域,其染色后可用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。
本產品為溶液,分為2種形式,濃度為5 mg/mL和即用型,即用型產品可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色。5 mg/mL DAPI需稀釋后使用。用于細胞核染色時,推薦的DAPI工作濃度為0.5-10 μg/mL。
保存條件
冰袋運輸,-20oC避光保存,至少1年有效。
注意事項
1.DAPI對人體有一定刺激性,請注意適當防護。
2.熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當天完成檢測。
3.為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4.低濃度的DAPI不容易穿透細胞膜。
5.本產品僅用于科學研究,不得用于臨床診斷和治療,不得用于食品和藥品,不得存放于普通住宅內。
6.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明
對于固定的細胞或組織樣品,固定后,適當洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的最后進行。如果不需要進行其它染色,則直接進行DAPI染色。
1.配制工作液:用雙蒸水或PBS稀釋母液,配制成所需要的工作的濃度(0.5-10 μg/mL)。
2.對于貼壁細胞或組織切片:加入適量DAPI染色液,覆蓋住樣品即可。
對于懸浮細胞:至少加入樣本體積3倍的染色液,混勻。
3.室溫放置3-5 min。
4.吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5 min。
5.直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長360 nm,發射波長460 nm。細胞發生凋亡時,會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。