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發布者: 發布時間:2022-05-08 21:58:09
紅細胞裂解液
Red Blood Cell Lysis Buffer
產品貨號:JY02011 規格:100 mL 銷售價格:¥ 70
產品貨號:JY02012 規格:500 mL 銷售價格:¥ 180
產品簡介
紅細胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer,或稱ACK Lysis Buffer),是一種經典的用于從人或鼠等血液或組織樣品中去除無核紅細胞的裂解液,幾乎不損傷淋巴細胞(lymphocyte)或其它有核細胞。本產品是利用細胞內滲透壓濃度差而導致細胞膜脹破的原理裂解紅細胞,主要成分包含氯化銨。因銨根離子無法通過細胞膜,而其他離子可以通過,造成細胞內外的離子濃度差異,外部水分擴散至細胞內,使紅細胞膨脹,達到裂解效果。
經紅細胞裂解液裂解得到的組織細胞中不含紅細胞,可進一步用于淋巴細胞的分離純化、原代培養、細胞融合、流式細胞分析、核酸與蛋白的提取等。本裂解液適用于人,大小鼠等哺乳動物新鮮血液,不適用于有核紅細胞的裂解,例如鳥或禽類的紅細胞。本產品經過無菌處理。
保存條件
常溫配送。4 oC保存,1年有效。
注意事項
1.本產品為無菌試劑,使用時請注意無菌操作,避免細菌污染。
2.通常情況下,血液樣品與紅細胞裂解液按1:3比例裂解,對一些特殊病例如白血病、紅細胞增多癥等,建議采用1:4或更高比例以保證結果。
3.在離心洗滌后,如發現極微量的紅細胞,可繼續試驗,不會影響后續檢測。
4.本產品僅用于科學研究,不得用于臨床診斷和治療,不得用于食品和藥品,不得存放于普通住宅內。
5.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明
對于組織細胞樣本:
1.新鮮組織經過膠原酶或胰酶等消化處理,通過適當方法分散成細胞懸液,離心棄上清。
2.加入3-5倍細胞體積的紅細胞裂解液,輕輕吹打混勻,裂解2 min,期間適當搖晃或顛倒混勻。例如細胞沉淀的體積為1 mL,則加入3-5 mL的紅細胞裂解液。
3.400-500 g離心5 min,棄上清。
4.如果發現紅細胞裂解不完全,可以重復上述步驟2和步驟3一次。通常極微量的紅細胞不會影響后續的實驗。
5.洗滌1-2次:加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液,重懸沉淀,400-500 g離心5 min,棄上清。可再重復1次,共洗滌1-2次。洗滌液的用量通常應至少為細胞沉淀體積的5倍。
6.根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀后即可進行計數等后續實驗。
對于血液樣本:
1a.取新鮮抗凝血,400-500 g離心5 min,棄上清。加入6-10倍細胞體積的紅細胞裂解液,輕輕吹打混勻,裂解2 min,期間適當搖晃或顛倒混勻。
1b.或者直接向新鮮抗凝血中加入3-5倍血液體積的紅細胞裂解液,輕輕吹打混勻,裂解4-5 min,期間適當搖晃或顛倒混勻。
2.400-500 g離心5 min,棄紅色上清。
3.如果發現紅細胞裂解不完全,可以重復上述步驟1和步驟2一次。通常極微量的紅細胞不會影響后續的實驗。
4.洗滌1-2次:加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液,重懸沉淀,400-500 g離心5 min,棄上清。可再重復1次,共洗滌1-2次。洗滌液的用量通常應至少為細胞沉淀體積的5倍。
5.根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀后即可進行計數等后續實驗。
注:對于微量或少量的血液樣品,可以直接向全血中加入紅細胞裂解液。