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紅細(xì)胞裂解液

Red Blood Cell Lysis Buffer

產(chǎn)品貨號：JY02011      規(guī)格：100 mL        銷售價(jià)格：￥ 70

產(chǎn)品貨號：JY02012       規(guī)格：500 mL        銷售價(jià)格：￥ 180

紅細(xì)胞裂解液 說明書 v11.pdf

產(chǎn)品簡介

紅細(xì)胞裂解液（Red Blood Cell Lysis Buffer，或稱ACK Lysis Buffer），是一種經(jīng)典的用于從人或鼠等血液或組織樣品中去除無核紅細(xì)胞的裂解液，幾乎不損傷淋巴細(xì)胞（lymphocyte）或其它有核細(xì)胞。本產(chǎn)品是利用細(xì)胞內(nèi)滲透壓濃度差而導(dǎo)致細(xì)胞膜脹破的原理裂解紅細(xì)胞，主要成分包含氯化銨。因銨根離子無法通過細(xì)胞膜，而其他離子可以通過，造成細(xì)胞內(nèi)外的離子濃度差異，外部水分?jǐn)U散至細(xì)胞內(nèi)，使紅細(xì)胞膨脹，達(dá)到裂解效果。

經(jīng)紅細(xì)胞裂解液裂解得到的組織細(xì)胞中不含紅細(xì)胞，可進(jìn)一步用于淋巴細(xì)胞的分離純化、原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、流式細(xì)胞分析、核酸與蛋白的提取等。本裂解液適用于人，大小鼠等哺乳動物新鮮血液，不適用于有核紅細(xì)胞的裂解，例如鳥或禽類的紅細(xì)胞。本產(chǎn)品經(jīng)過無菌處理。

保存條件

常溫配送。4 oC保存，1年有效。

注意事項(xiàng)

1．本產(chǎn)品為無菌試劑，使用時(shí)請注意無菌操作，避免細(xì)菌污染。

2．通常情況下，血液樣品與紅細(xì)胞裂解液按1:3比例裂解，對一些特殊病例如白血病、紅細(xì)胞增多癥等，建議采用1:4或更高比例以保證結(jié)果。

3．在離心洗滌后，如發(fā)現(xiàn)極微量的紅細(xì)胞，可繼續(xù)試驗(yàn)，不會影響后續(xù)檢測。

4．本產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究，不得用于臨床診斷和治療，不得用于食品和藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。

5．為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用說明

對于組織細(xì)胞樣本：

1．新鮮組織經(jīng)過膠原酶或胰酶等消化處理，通過適當(dāng)方法分散成細(xì)胞懸液，離心棄上清。

2．加入3-5倍細(xì)胞體積的紅細(xì)胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解2 min，期間適當(dāng)搖晃或顛倒混勻。例如細(xì)胞沉淀的體積為1 mL，則加入3-5 mL的紅細(xì)胞裂解液。

3．400-500 g離心5 min，棄上清。

4．如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2和步驟3一次。通常極微量的紅細(xì)胞不會影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

5．洗滌1-2次：加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，重懸沉淀，400-500 g離心5 min，棄上清。可再重復(fù)1次，共洗滌1-2次。洗滌液的用量通常應(yīng)至少為細(xì)胞沉淀體積的5倍。

6．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀后即可進(jìn)行計(jì)數(shù)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

對于血液樣本：

1a．取新鮮抗凝血，400-500 g離心5 min，棄上清。加入6-10倍細(xì)胞體積的紅細(xì)胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解2 min，期間適當(dāng)搖晃或顛倒混勻。

1b．或者直接向新鮮抗凝血中加入3-5倍血液體積的紅細(xì)胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解4-5 min，期間適當(dāng)搖晃或顛倒混勻。

2．400-500 g離心5 min，棄紅色上清。

3．如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟1和步驟2一次。通常極微量的紅細(xì)胞不會影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

4．洗滌1-2次：加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，重懸沉淀，400-500 g離心5 min，棄上清。可再重復(fù)1次，共洗滌1-2次。洗滌液的用量通常應(yīng)至少為細(xì)胞沉淀體積的5倍。

5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀后即可進(jìn)行計(jì)數(shù)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

注：對于微量或少量的血液樣品，可以直接向全血中加入紅細(xì)胞裂解液。