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分子生物學產品 / PRODUCT

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分子生物學產品

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西安DNA 退火緩沖液(5×) Annealing Buffer for DNA Oligos (5×)

發布者:  發布時間:2017-10-16 16:43:43

DNA退火緩沖液(

Annealing Buffer for DNA Oligos (5×)


產品貨號:JY04011       規格:2 mL       銷售價格:¥ 50

產品貨號:JY04012       規格:5 mL       銷售價格:¥ 100


Annealing Buffer for DNA Oligos 說明書.pdf


產品簡介

Annealing Buffer for DNA Oligos (5×),DNA寡核苷酸退火緩沖液,該退火緩沖液不僅可以用于常規DNA Oligos 的退火,而且特別適合于較難退火的構建RNAi siRNA shRNA質粒的DNA Oligos,可以有效避免DNA Oligos自身形成發夾結構,并且兩條Oligos退火后可以直接和經酶切純化的質粒連接。通常轉化后可以得到大量的陽性克隆。

保存條件

常溫配送。一個月內,4 oC保存。-20 oC長期保存,至少1年有效。

注:瓶身標記MFG為生產日期,因為生化與分子試劑貯存得當,可用時間長于有效期,故標出生產日期,方便提示試劑實際已貯存時間。

注意事項

1DNA退火緩沖液()只適合于DNA Oligos的退火,不能用于RNA Oligos的退火

2本產品僅用于科學研究,不得用于臨床診斷和治療,不得用于食品和藥品,不得存放于普通住宅內。

使用說明

1溶解Oligos

(1) 方法一:用雙蒸水將DNA退火緩沖液()稀釋成。 → Oligos干粉用DNA退火緩沖液()配制成20 μM取等體積DNA Oligo ADNA Oligo B混勻。

(2) 方法二:將Oligos干粉用雙蒸水配制成50 μM配置如下退火反應體系,混勻。

image.png

NoteOligos的濃度根據實驗要求進行調整。

2.退火

(1) 方法一:將退火反應體系置于PCR儀中,設置反應條件:95℃變性2 min-1℃/30s/cycle緩慢降溫至25℃。程序設置以Bio-RadT100為例為:1. 95℃, 2:00; 2. 95℃, 0:30, -1℃ per cycle; 3. GOTO step 2, 70×; 4. 4℃, ∞

  對于易形成發卡結構的Oligos可以延長時間降溫時間:95℃變性2 min-1℃/90s/cycl緩慢降溫至25℃。程序設置以Bio-RadT100為例為:1. 95℃, 2:00; 2. 95℃, 1:30, -1℃ per cycle; 3. GOTO step 2, 70×; 4. 4℃, ∞

(2) 方法二:將退火反應體系放于95°C水浴鍋,持續2 min,后將退火反應體系置于一杯1 L95°C的水中,讓其自然冷卻至室溫。若是易形成發卡結構的Oligos,可以將95°C水放于保溫杯中開蓋降溫。

Note緩慢降溫對形成正確的結構是非常有幫助的,降溫過快將導致錯誤結構的產生。

3.退火結束后可直接用于連接反應,也可以-20oC凍存備用。若進行酶切等其它反應,可用純化試劑盒進行純化,或者確保退火產物在反應體系中體積不超過5%,以避免退火緩沖液對后續酶反應體系的干擾。



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